LL-37 5mg (CAP-18) – Peptide Sciences

Sequência: -Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser _Fórmula
Molecular: C₂₀₅H₃₄₀N₆₀O₅₃ _Peso Molecular : _4493,342 g/mol PubChem CID: 16198951 Número CAS: _154947-66-7 Sinônimos : CAP-18, Catelicidina, peptídeo antibacteriano LL – 37

LL-37 é um peptídeo curto, carregado positivamente e com caráter anfipático, que interage com superfícies lipídicas aniônicas e componentes do envelope microbiano. Em estudos biofísicos, LL-37 pode adotar conformações consistentes com estados associados à membrana, permitindo a formação de poros e/ou a desestabilização da membrana sob condições definidas. Os resultados experimentais podem variar de acordo com a composição do tampão, a força iônica e a presença de proteínas séricas que sequestram ou inibem a atividade do peptídeo.

LL-37 é comumente empregado como uma sonda mecanística em diversos contextos de pesquisa pré-clínica, incluindo:

• Ensaios de interface hospedeiro-patógeno: avaliação das interações peptídeo-membrana, inibição do crescimento microbiano e estudos de sinergia com outros fatores de defesa inata (por exemplo, defensinas, lisozima) em sistemas in vitro controlados.
• Estudos de reconhecimento de padrões e sinalização inata: investigação da ligação/neutralização de LPS e modulação subsequente de vias imunes inatas em ensaios baseados em células.
• Ensaios de comportamento de leucócitos: estudos de quimiotaxia e migração em neutrófilos/eosinófilos e perfil de resposta dependente do estado de ativação de células imunes.
• Modelos de barreira epitelial: ensaios de arranhão/fechamento de feridas, migração epitelial e medições da integridade da barreira sob estímulos inflamatórios em modelos de cultura.
• Modelos de biologia vascular: experimentos de sinalização endotelial focados nas vias dos eicosanoides e nos programas angiogênicos in vitro e in vivo (modelos animais).
• Mapeamento da rede inflamatória: perfil de resposta de citocinas e interferon (ex.: IFN-α, IL-18) e modulação da resposta de polarização de macrófagos in vitro.

A seleção do formato do ensaio e dos controles deve levar em consideração os efeitos de matriz conhecidos (por exemplo, inibição do soro), a adsorção do peptídeo aos plásticos e a citotoxicidade dependente da concentração observada em alguns contextos experimentais relatados na literatura pré-clínica.

Fonte: Karger

Do ponto de vista mecanístico, o LL-37 é frequentemente estudado no contexto de:

• Direcionamento do envelope microbiano: interação com LPS e outras estruturas superficiais aniônicas, levando à perturbação da membrana e à perda da integridade do envelope em organismos suscetíveis.
• Interação entre receptores da imunidade inata: modulação da sinalização de receptores de reconhecimento de padrões, incluindo efeitos relatados envolvendo vias de receptores Toll-like em estudos com células e modelos animais.
• Sinalização quimiotática e imunomoduladora: regulação dos sinais de tráfego de leucócitos e ajuste dependente do contexto da produção de citocinas, que varia de acordo com o tipo celular e o estado de ativação.
• Programas de restituição epitelial: envolvimento de respostas migratórias/proliferativas em modelos epiteliais, utilizados para mapear a sinalização de restauração da barreira em paradigmas de lesão experimental.
• Sinalização vascular mediada por eicosanoides: indução de módulos de sinalização da prostaglandina E2 (PGE2) em sistemas endoteliais, incluindo programas angiogênicos ligados ao receptor EP relatados em modelos animais e celulares.

Como o LL-37 pode funcionar tanto como um peptídeo ativo diretamente na membrana quanto como um modulador da resposta da célula hospedeira, a interpretação experimental se beneficia de leituras ortogonais (ensaios de integridade da membrana, ensaios de repórter de receptor/via, perfil de citocinas transcritas/proteicas e controles de viabilidade) para diferenciar os efeitos primários na membrana dos eventos de sinalização subsequentes.

Modelos Associados à Inflamação

Em sistemas pré-clínicos e ex vivo, o LL-37 é repetidamente descrito como um imunomodulador dependente do contexto. As observações relatadas incluem alterações nos programas de sobrevivência dos queratinócitos, mudanças na produção de interferon e interleucina (incluindo IFN-α e IL-18 em modelos definidos), efeitos quimiotáticos em linhagens de granulócitos e modulação de redes de sinalização inflamatória ligadas a receptores (incluindo efeitos relatados envolvendo a sinalização associada ao TLR4 em sistemas de ensaio selecionados) ^[1] .

Estudos baseados em células também indicam que o estado de ativação das células imunes pode alterar os resultados associados ao LL-37, incluindo assinaturas inflamatórias diferenciais em populações de linfócitos sob diferentes condições de estimulação ^{[2Esses resultados apoiam o uso de LL} -37 como ferramenta para mapear comportamentos de redes homeostáticas versus pró-inflamatórias em delineamentos experimentais rigorosamente controlados.

Estudos de interação antimicrobiana e com LPS

LL-37 é amplamente utilizado em experimentos de mecanismo de ação antimicrobiana, incluindo estudos de acúmulo induzível de peptídeos em tecidos de barreira sob desafio infeccioso e experimentos de sinergia com outros fatores de defesa inata, como a beta-defensina 2 humana ^[3] . Uma ênfase mecanística comum é a ligação do LL-37 ao LPS, com resultados experimentais que examinam a capacidade de neutralização do LPS, a potência antimicrobiana e a inibição dependente da matriz (por exemplo, atenuação associada ao soro) in vitro ^[4] .

Embora a atividade de direcionamento à membrana seja frequentemente destacada em contextos Gram-negativos, o LL-37 também foi estudado contra organismos Gram-positivos. Relatórios in vitro descrevem efeitos cooperativos com lisozima e defensinas contra organismos como Staphylococcus aureus , apoiando seu uso como uma sonda para paradigmas de estresse do envelope e sinergia multiefetor ^[5] .

Sistemas de modelos de vias aéreas e epitélio

Estudos pré-clínicos focados nas vias aéreas examinam o LL-37 em contextos de estímulos inflamatórios inalados e modelos de perturbação da barreira, frequentemente utilizando estímulos induzidos por LPS para investigar a dinâmica da resposta inata. Em modelos de cultura epitelial, foi relatado que o LL-37 estimula a proliferação do epitélio das vias aéreas e as respostas de fechamento de feridas por arranhão, permitindo a investigação da via de sinalização associada à restituição e reparo epitelial in vitro ^[7] .

Literatura experimental relacionada à artrite

Em estudos com roedores e análises observacionais em ambientes articulares inflamados, as catelicidinas (incluindo LL-37 e ortólogos de espécies relacionadas) foram avaliadas quanto às suas associações com eventos inflamatórios e padrões de remodelação tecidual ^[8] . Trabalhos independentes em modelos de camundongos não relatam evidências de um papel patogênico necessário das catelicidinas em determinados modelos de lúpus/artrite, apoiando a interpretação de que a regulação positiva das catelicidinas pode refletir biomarcadores do estado inflamatório, em vez de fatores determinantes em alguns paradigmas ^[9] .

Derivados de LL-37 também têm sido usados como ferramentas mecanísticas em modelos de artrite induzida por colágeno para investigar vias associadas a danos no colágeno e correlatos de resposta de anticorpos in vivo (murinos), incluindo a modulação de parâmetros relacionados à reatividade ao colágeno tipo II ^[10] . Trabalhos adicionais in vitro avaliam LL-37/derivados em modelos de inflamação mediada por citocinas (por exemplo, sistemas estimulados por IL-32) para mapear as respostas de sinalização a montante/a jusante ^[11] .

Estudos também avaliam a dinâmica de expressão do receptor Toll-like em sistemas de fibroblastos sinoviais (por exemplo, regulação positiva do TLR3 sob influência de células imunes) como uma estrutura para avaliar como o LL-37 pode se interconectar com circuitos de amplificação inflamatória ligados a PRR in vitro e em modelos animais ^[12] . Estudos focados em macrófagos relatam ainda a atenuação seletiva de respostas pró-inflamatórias de macrófagos em condições definidas, enfatizando o uso do peptídeo para dissecar os sinais associados à polarização ^[13] .

Modelos de barreira intestinal e sistemas relacionados

Sistemas epiteliais in vitro relatam efeitos associados ao LL-37 na migração epitelial e na integridade da barreira sob condições de estresse inflamatório, o que justifica seu uso frequente em ensaios de restauração da barreira e na análise de apoptose/viabilidade em contextos de estímulos controlados ^{.14Estudos adicionais em cultura de células descrevem o comportamento cooperativo entre a beta-defensina 2 e os processos de reparo epitelial, incluindo a redução de marcadores de morte celular relacionados ao} TNF em condições experimentais definidas ^[15] .

Mecanismos pré-clínicos adjacentes ao câncer

A literatura pré-clínica descreve observações mistas e dependentes do contexto em relação ao LL-37 em modelos de biologia tumoral. Discussões mecanísticas frequentemente se concentram na imunobiologia do microambiente tumoral, incluindo programas ligados a macrófagos e regulação da expressão de peptídeos antimicrobianos associada à vitamina D em sistemas experimentais ^[16] .

Modelos de sinalização endotelial e angiogênese

Foi relatado que o LL-37 induz a sinalização endotelial de PGE2 e respostas angiogênicas ligadas ao receptor EP in vitro e in vivo (modelo animal), oferecendo uma estrutura viável para o estudo de módulos de remodelação vascular impulsionados por eicosanoides sob condições experimentais definidas ^[17] .

Este peptídeo RUO é fornecido para experimentação em laboratório. A caracterização analítica padrão para peptídeos sintéticos geralmente inclui abordagens ortogonais de confirmação de identidade e pureza (por exemplo, espectrometria de massa e métodos cromatográficos). Os pesquisadores devem implementar procedimentos de manuseio adequados para peptídeos, incluindo a minimização de ciclos repetidos de congelamento e descongelamento, a redução de perdas por adsorção em plásticos e a seleção de sistemas de solventes/tampões compatíveis com os ensaios subsequentes.

Como a atividade do LL-37 é sensível às condições da matriz do ensaio, recomenda-se a realização de controles experimentais para levar em consideração a ligação/inibição do soro, os efeitos da força iônica e a citotoxicidade dependente da concentração observada em alguns formatos in vitro relatados na literatura.

Para estudos de estrutura-função, o comportamento conformacional distinto do LL-37 entre espécies e variantes de sequência fornece uma plataforma útil para investigar como as substituições de aminoácidos alteram a associação à membrana, o engajamento do receptor e as respostas de sinalização subsequentes em modelos experimentais controlados ^[18] .

A literatura acima foi pesquisada, editada e organizada pelo Dr. Logan, médico. O Dr. Logan possui doutorado pela  Faculdade de Medicina da Universidade Case Western Reserve  e bacharelado em biologia molecular.

Daniela Xhindoli, PhD, trabalha na Universidade de Trieste, UNITS · Departamento de Ciências da Vida. Seu foco de pesquisa são as bactérias gram-negativas, as atividades biológicas do LL-37 na modulação simultânea de vias pró-inflamatórias e anti-inflamatórias, e os efeitos antibacterianos e antimicrobianos do LL-37.

A Dra. Daniela Xhindoli  é citada como uma das principais cientistas envolvidas na pesquisa e desenvolvimento do LL-37. De forma alguma esta médica/cientista está endossando ou defendendo a compra, venda ou uso deste produto por qualquer motivo. Não há qualquer vínculo ou relação, implícita ou explícita, entre a Peptide Sciences e esta médica. O objetivo de citá-la é reconhecer e dar crédito aos exaustivos esforços de pesquisa e desenvolvimento conduzidos pelos cientistas que estudam este peptídeo. A Dra. Daniela Xhindoli está listada em [18] nas citações referenciadas.